TUhjnbcbe - 2021/4/25 18:32:00
蝴蝶兰是重要的室内开花作物。除此之外因为他的一些特殊性，包括花型的多样，核及叶绿体光合作用NDH基因的缺失，兰菌共生，以及细小种子等特性，引起的许多研究学者的注意。MADS被认为是与花的形态有关。但在蝴蝶兰的基因组当中，有50个以上的MADS基因。如何有效率地获得这些基因的突变种，这将会对蝴蝶兰产业以及基础研究有很大的帮助。近日，中央研究院团队在PlantBiotechnologyJournal上发表了题“High-efficiencyCRISPR/Cas-basededitingofPhalaenopsisorchidMADSgenes”的研究论文。在本文中，作者使用不同的载体构筑及转殖策略，成功得到了三个MADS，（MADS8,MADS36,MADS44)基因的单突变，双突变及三突变。而且编辑效率相当高，只要有sgRNA的转殖进入基因组就可以得到突变株。在这个过程当中作者发现两个特别的现象。第一，蝴蝶兰对于PAM的要求并不如其他的生物严格，一定要NGG才可以，在PAM序列为CGA的靶位亦有被编辑的效果。第二，有两个突变株，并没有发现相对应的sgRNA插入到核基因组中。这代表只要短暂表现sgRNA及Cas9蛋白，就可以利用农杆菌得到无外源DNA的突变株。这个策略将可以减少人们对于转基因作物的担心。台湾中央研究院农生中心董启功助技师，吴馥卉及袁郁??研究助理为共同第一作者，中央研究院农生中心林崇熙研究技师为通讯作者。该项目获得了中央研究院及创新转译农学研究计画ITAR经费的支持。原文链接：